Розробка ПЛР для одночасного виявлення Pasteurella multocida та Haemophilus parasuis

Анотація

Pasteurella multocida та Haemophilus parasuis, є основними збудниками респіраторних захворювань свиней на колективних свинарських фермах усіх країн з розвиненим свинарством. Збудники мають значний вплив на дихальні шляхи свиней та серйозно перешкоджають росту і розвитку, а відповідно, знижують продуктивність. Тому метод швидкого виявлення цих мікроорганізмів є запорукою успішної профілактики та контролю інфекцій.

Традиційні методи лабораторних досліджень для підтвердження попереднього діагнозу, поставленого на підставі аналізу даних анамнезу, клінічних симптомів, патологічних змін та епідеміологічних характеристик захворювання, включають бактеріологічні дослідження Pasteurella multocida та Haemophilus parasuis, культуральну, біохімічну та імунологічну ідентифікацію. Ці методи трудомісткі й не можуть задовільнити потреби у швидкій діагностиці, що ускладнює можливості профілактики та контролю хвороб тварин. Pasteurella multocida та Haemophilus parasuis обидві є збудниками синдрому респіраторних захворювань свиней (PRDC), і часто виступають у вигляді асоціаційованої інфекції, тому необхідно встановити точний і швидкий метод ідентифікації обох загальних збудників респіраторних хвороб у свиней. У цій роботі Pasteurella multocida та Haemophilus parasuis використовувались як об’єкти дослідження для розробки подвійного методу ПЛР-детекції.

Основний зміст досліджень полягає в наступному: було досліджено компоненти та реагенти та відпрацьовано покроковий порядок постановки подвійної ПЛР для одночасного виявлення Pasteurella multocida та Haemophilus parasuis, використовуючи специфічні для Pasteurella multocida and Haemophilus parasuis праймери, а також, регулюючи концентрацію праймерів та температуру відпалу.

Метод швидкого виявлення Pasteurella multocida та Haemophilus parasuis, описаний у цьому дослідженні, має високу специфічність та чутливість і може реалізувати швидку та точну ідентифікацію патогенних бактерій за відносно короткий проміжок часу, забезпечуючи нові технічні засоби для швидкого виявлення Pasteurella multocida та Haemophilus parasuis у лабораторії.